1987年,参加韩国“乐天选美大赛”,正式进入演艺圈。1995年,参演《像犀牛角那般一个人走吧》。1998年,李美妍与郑雨盛,朴新阳参演了由朴吉永执导的情色片《仙人掌旅馆》。1999年,参演悬疑片《女高怪谈之死亡教室》,获得第36届韩国电影大钟奖最佳女配奖。2000年,参演《错爱双鱼座》,获得第21届韩国电影青龙奖最佳女主角。2001年,第一次出演古装剧《明成皇后》,获得韩国国家电视台最佳女演员奖,。同年,李美妍与李正宰主演了由裴昶浩执导的影片《黑水仙》,扮演20来岁到60多岁的孙智慧,该剧描写了隐藏在连锁杀人案件背后的历史悲剧和爱情。2002年,李美妍与李秉宪参演《中毒》,获得韩国影视最高奖项“大钟奖”最佳女主角奖。2005年,李美妍与张东健,李政宰参演《台风》,讲述了身为海盗的张东健本想带着家人进入韩国,但却遭到拒绝,于是产生复仇心理。2007年,李美妍与李泰兰参演《肩膀背后的恋人》,该剧讲述了李美妍,李泰兰饰演的两个女主演之间的爱情和对性的理解。同年,与尹继尚,金恩珠参演了由孙正炫执导的影片《为爱疯狂》。2010年,参演以朝鲜时代为背景的古装剧《巨商金万德》,该剧讲述了在济州岛以自己全部财产救助岛民,将地位高责任重这一理念完全实践于生活的女性金万德的故事。2012年,李美妍四年后首次回归大银幕,与苏志燮参演动作片《上班族》,出演杀手的女人,讲述了任职“杀手公司”的杀手为了所爱之人金盆洗手后成为其他杀手追杀目标的故事。2016年2月17日与刘亚仁合作的电影《请点赞》在韩国上映。2021年,参演电视剧《卧底》。《纯美的相遇》剧照《黑水仙》剧照《中毒》
1995年与金承佑结婚,2000年离婚。
李美妍李美妍前辈在我们同龄人心中有着“国母”的形象,原以为前辈会很可怕,但是没想到她很会撒娇。虽然在《上班族》中饰演的是妈妈的角色,但感觉更像是姐姐。